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問:近年來,ELISA試劑盒食品安全問題已經(jīng)成為的焦點之一。食品安全本身涵蓋了從農(nóng)田到餐桌的全過程,包括農(nóng)藥和抗生素殘留、超量使用食品添加劑、違規(guī)使用人工合成化學(xué)品等。目前,我國食品安全監(jiān)查機(jī)構(gòu)對食品中有害物質(zhì)檢測仍以實驗室測定為主,zui為普遍的是色譜技術(shù)。雖能準(zhǔn)確定量檢測,但難于快速實時檢測,需要一定的時間周期。因此,食品中有害物質(zhì)快速檢測試劑盒越來越受到關(guān)注。不過,食品安全快速檢測試劑盒種類多樣,它們分別依據(jù)的是什么原理?
答:所謂的快速檢測方法,首先是要能縮短檢測時間,以及在樣品制備、實驗準(zhǔn)備、操作過程和自動化上簡化的方法。目前的檢測技術(shù)主要有化學(xué)比色分析法、免疫法、生物芯片、生物傳感器、金(熒光素)標(biāo)記法等一些現(xiàn)場快速篩選法。
化學(xué)比色分析法是根據(jù)食品中待測成分的化學(xué)特點,將待測食品通過化學(xué)反應(yīng)法,使待測成分與特定試劑發(fā)生特異性顯色反應(yīng),通過與標(biāo)準(zhǔn)品比較顏色或在一定波長下與標(biāo)準(zhǔn)品比較吸光度值得到zui終結(jié)果。這種方法因檢測時間短、成本低、簡單方便、快捷等特點,適用一般家庭或農(nóng)貿(mào)市場、超市快速檢測水果、蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量。不過,它的靈敏度也相對較低。
免疫分析技術(shù)在農(nóng)藥快速檢測的應(yīng)用研究中則比較活躍。酶聯(lián)免疫法是將酶標(biāo)記在抗體P抗原分子上,形成酶標(biāo)抗體P酶標(biāo)抗原,也稱為酶結(jié)合物,將抗體抗原反應(yīng)信號放大,提高檢測靈敏度,之后該酶結(jié)合物的酶作用于能呈現(xiàn)出顏色的底物,通過儀器或肉眼進(jìn)行辨別。它的優(yōu)點是特異性和靈敏度都比較高,對于現(xiàn)場初篩有較好應(yīng)用前景。
生物傳感器由生物感應(yīng)元件和與之緊密連接或組合的傳感器所組成。傳感器能將生物學(xué)事件轉(zhuǎn)變成可以被后續(xù)處理的響應(yīng)信號。生物傳感器具有選擇性好、響應(yīng)快、樣品需要量少、可微型化。但是,它在穩(wěn)定性、可靠性、一致性方面存在問題。目前,生物傳感器主要應(yīng)用于L-抗壞血酸、抗氧化劑、膽堿、谷氨酸鹽、卵磷脂和亞硫酸鹽測定。
ELISA試劑盒基因芯片是指按照預(yù)定位置固定在固相載體上很小面積內(nèi)的千萬個核酸分子所組成的微點陣列。在檢測致病菌的過程中,首先選擇細(xì)菌的共有基因作為靶基因,用一對通用引物進(jìn)行擴(kuò)增,再利用芯片上的探針檢測不同細(xì)菌在該共有基因上的*堿基,從而區(qū)分不同的細(xì)菌。生物芯片檢測的自動化程度非常高,能夠?qū)崿F(xiàn)同時檢測多種目標(biāo)分子的目的,而且檢測效率高。不過,在前期需要大量已測知的DNA片段信息,檢測費(fèi)用仍然偏高。